BRAF

Analisi mutazionale gene BRAF

La determinazione dello stato mutazionale di BRAF è indicata per la scelta della migliore   strategia terapeutica nei pazienti con melanoma inoperabile o metastatico (stadio III o IV) che possono beneficiare, in presenza di mutazione V600, del trattamento con inibitori di BRAF.

La mutazione V600E, che consiste nella sostituzione della valina con acido glutammico nel codone 600, rappresenta circa il 90 % (88-92%) delle mutazioni di BRAF nel melanoma, la V600K ha una frequenza 6-8% circa mentre altre mutazioni, quali la V600R e la V600D, sono meno frequenti.

Metodo Analitico :

• Estrazione del DNA
• Amplificazione mediante PCR
• Pyrosequenziamento ( kit validati CE-IVD)

Campione su cui effettuare l’esame:

- Inclusione in paraffina :

               Blocchetto di inclusione in paraffina di carcinoma infiltrante, primitivo o

               Metastatico ,nella quale la neoplasia sia prevalente, rispetto al tessuto sano.

- Vetrini istologici in bianco :

         se le cellule tumorale sono inferiore al 70%

                   - 6 sezioni dello spessore di 10 µM, poste su vetrino

           se le cellule tumorale sono superiore del 70%

                   - 4 sezioni da 10 µM di tessuto da consegnare in tubo/eppendorf